hrvatski

Utvrđivanje genetičkog uzroka neplodnosti analizom mikrodelecija AZF područja Y kromosoma

Muška neplodnost pogađa 10 do 15% parova, a u više od polovice muške neplodnosti uzrok je nepoznat (idiopatska neplodnost). AZF područje kromosoma Y koji se nalazi na dugom kraku Y kromosoma sadrži gene uključene u spermatogenezu. Mikrodelecije Y kromosoma u AZF području jedan su od genetičkih uzroka neplodnosti u muškaraca. Udružene su s teškim poremećajem spermatogeneze. Učestalost mikrodelecija Y kromosoma u muškaraca s potvrđenom AZO ili OAS varira od 1 do 55%. Cilj ovog rada bio je usporediti genotipove dobivene analizom rutinskog uzorka za izolaciju DNA (periferna krv) i uzorka brisa bukalne sluznice kao alternativnog, neinvazivno dobivenog uzorka te procijeniti mogućnosti uvođenja uzorkovanja stanica bukalne sluznice u rutinsku dijagnostiku. Uzorci su analizirani metodom višestruke lančane reakcije polimerazom i horizontalnom agaroznom gel elektroforezom. Količina DNA u uzorku određena je lančanom reakcijom polimeraze u stvarnom vremenu. Obrađeno je 35 ispitanika od kojih je troje imalo mikrodeleciju AZF područja dok ostali imaju uredan nalaz. Analizirano je 6 STS lokusa u AZF području Y kromosoma. Kod prisutne delecije u AZFa, AZFb ili AZFc potpodručju analizirani su dodatni STS lokusi. Od 35 uzoraka krvi i brisa bukalne sluznice, 25 uzoraka brisa bukalne sluznice bilo je informativno. Prosječna koncentracija DNA iz brisa bukalne sluznice iznosila je 10, 46 ng/µl, najmanja koncentracija DNA je iznosila 0, 01 ng/µl, a najveća koncentracija 73, 37 ng/µl. Prosječna koncentracija DNA iz informativnih brisova bukalne sluznice iznosila je 14, 63±22, 96 ng/µl, najmanja koncentracija DNA iznosila je 0, 2 ng/µl, a najveća 73, 37 ng/µl. Prosječna koncentracija DNA iz uzorka pune krvi iznosila je 334, 89 ng/µl, najmanja je iznosila 29, 58 ng/µl, a najveća 870, 19 ng/µl. Uzorci periferne krvi pouzdaniji su za analizu mikrodelecija Y kromosoma jer su manja odstupanja prilikom uzorkovanja, odnosno, uzorkovanje i transport brisa bukalne sluznice potrebno je standardizirati prije nego se počne primjenjivati kao rutinski dijagnostički uzorak.

muška neplodnost ; Y kromosom ; AZF područje

nije evidentirano