hrvatski

Usporedba različitih postupaka izdvajanja virusne RNA iz ptičjeg mozga

Brza i točna dijagnostika zaraznih bolesti životinja vrlo je bitna radi pravodobnog sprječavanja širenja bolesti i posljedičnih velikih gubitaka. Tehnike molekularne biologije, posebno izolacija RNA i DNA, nalaze veliku primjenu u dijagnostici virusnih infekcija. U ovom radu je istražen učinak uranjanja uzoraka u tekući dušik i uspješnost 4 različite metode izolacije virusne RNA iz tkiva mozga pokusno zaraženih pilića koje je pohranjeno na -70°C. RNA je izolirana korištenjem komercijalnih reagensa: 1) Roche High Pure Viral Nucleic Acid Kit, 2) TRIzol®, 3) Qiagen RNeasy Lipid Tissue Mini Kit te 4) kombinacijom TRIzol® i Roche High Pure Viral Nucleic Acid Kita. Prinosi RNA su uspoređeni RRT-PCR analizom na LightCycler 1.5 uređaju. Svaka metoda je dala dovoljnu količinu RNA za potvrdu prisutnosti ptičjeg paramiksovirusa tipa 1, ali najbolji prinosi su dobiveni Qiagen kitom i TRIzol® metodom. Uranjanje tkiva u tekući dušik nije utjecalo na prinos RNA.

ptičji paramiksovirus tipa 1; newcastelska bolest; RRT-PCR

nije evidentirano