hrvatski

Optimiranje uvjeta analize tetrahidrokanabinola i metabolita u urinu štakora primjenom vezanog sustava plinski kromatograf-spektrometar masa

Zbog rastućeg javnog mišljenja o antitumorskom potencijalu tetrahidrokanabinola (THC) te kao sredstvu za ublažavanje simptoma kemoterapije irinotekanom, dio onkoloških bolesnika poseže za neregistriranim pripravcima THC-a. Da bi se procijenio utjecaj THC-a na metabolizam irinotekana na eksperimentalnom modelu štakora, potrebno je razviti osjetljivu, točnu i preciznu analitičku metodu kojom se može odrediti masena koncentracija THC-a te njegovih metabolita [11- hidroksi-delta-9- tetrahidrokanabinola (THC-OH) i 11-nor-delta-9- tetrahidrokanabinol-9- karboksilne kiseline (THC-COOH)] u urinu štakora kojima je apliciran samo THC, te u grupi kojoj je istovremeno apliciran THC i irinotekan. U tu su svrhu optimirani uvjeti hidrolize i ekstrakcije ispitivanih analita te se proveo razvoj i validacija plinsko-kromatografske metode uz detekciju spektrometrom masa (GC/MS) za istovremeno određivanje sva tri ispitivana analita. Optimalnom metodom hidrolize THC, THC- OH i THC-COOH glukuronida, pokazala se kombinirana hidroliza, enzimom β-glukuronidazom iz E. coli na 50 °C tijekom 2 sata, nakon koje je slijedila alkalna hidroliza. Ekstrakcija na čvrstoj fazi prilagođena za kanabinoide korištena je prije GC/MS analize. Predloženom metodom analiziran je istovremeno sadržaj sva tri analita u urinu štakora prikupljenog unutar 24 sata od tretmana (n = 10). THC nije detektiran niti u jednom uzorku, THC-OH je detektiran u 50 % uzoraka, a THC-COOH u svim uzorcima. Metoda opisana u radu zbog svoje je osjetljivosti (granice detekcije: 0, 8-1 µg/L), točnosti (> 96 %) i preciznosti (RSD < 6 %) pogodna za određivanje masene koncentracije THC- a i metabolita u urinu štakora.

GC/MS ; tetrahidrokanabinol ; urin štakora ; metaboliti ; hidroliza

nije evidentirano