Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: Ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija (CROSBI ID 423826)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Gucunski, Karolina
Luić, Marija
Leščić Ašler, Ivana
hrvatski
Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: Ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija
Cilj ovog rada je pročišćavanje, karakterizacija i kristalizacija enzima purinske nukleozidne fosforilaze (PNPaza) iz bakterije Helicobacter pylori. PNPaza katalizira reverzibilno fosforolitičko cijepanje glikozidne veze ribo- i deoksiribonukleozida, u prisutnosti fosfata kao sekundarnog supstrata u svrhu nastajanja purinske baze i riboze(deoksiriboze)-1-fosfata. Neophodan je enzim kod sinteze purina iz metaboličkog otpada, jedinog aktivnog puta za sintezu purina u bakteriji H. pylori. Optimizirana je ekspresija PNPaze u bakteriji Escherichia coli. Prekomjerno eksprimirana PNPaza je pročišćena anionskom izmjenjivačkom kromatografijom i afinitetnom kromatografijom na koloni s vezanim inhibitorom. Aktivnost pročišćenog enzima ispitana je spektrofotometrijski uz različite primarne supstrate. Određeni su kinetički parametri i ispitana je ovisnost aktivnosti PNPaze o pH i temperaturi reakcijske smjese. Postavljeni su eksperimenti kristalizacije s pročišćenim enzimom metodom difuzije para u visećoj kapi u različitim uvjetima.
afinitetna kromatografija s vezanim inhibitorom, anionska izmjenjivaĉka kromatografija, Helicobacter pylori, kinetiĉki parametri, kristalizacijske probe, purinska nukleozidna fosforilaza
nije evidentirano
engleski
Purine nucleoside phosphorylase from bacterium Helicobacter pylori strain 26695: Expression, purification and characterisation
nije evidentirano
affinity chromatography with bound inhibitor, anionic exchange chromatography, Helicobacter pylori, kinetic parameters, crystallization probes, purine nucleoside phosphorylase
nije evidentirano
Podaci o izdanju
52
28.09.2018.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb