hrvatski

Heterologna ekspresija rekombinantnih enzima za razgradnju atrazina na površini stanične stijenke kvasca Saccharomyces cerevisiae

Kvasac Saccharomyces cerevisiae jedan je od najčešće korištenih mikroorganizama u biotehnologiji, biomedicini i raznim znanstvenim istraživanjima. U ovom radu kvasac se koristio za ekspresiju enzima za razgradnju atrazina koji potječu iz Pseudomonas sp. ADP. Atrazin je herbicid koji je zabranjen od strane EU jer zbog svog kumulativnog efekta izaziva onečišćenje okoliša. Metabolički put razgradnje atrazina se sastoji od šest enzimskih reakcija od kojih je svaka katalizirana s po jednim enzimom. Cilj rada je bio eksprimirati i imobilizirati na površini stanične stijenke kvasca S. cerevisiae prva četiri enzima metaboličkog puta razgradnje atrazina (AtzA, AtzB, AtzC i AtzD), a u tu svrhu korišteni su proteini stanične stijenke kvasca Pir4 i Ccw12 s kojima su ti enzimi bili genetički fuzionirani. Uspješnost ekspresije i imobilizacije rekombinantih proteina provjeravala se Western blot analizom proteina ekstrahiranih iz izoliranih staničnih stijenki kvasca. Osim toga ispitivala se i aktivnost eksprimiranih rekombinantih enzima u tekućem mediju i na krutoj podlozi u Petrijevim zdjelicama.

Atrazin, Ccw12, Pir4, rekombinantni protein, Saccharomyces cerevisiae

nije evidentirano