hrvatski

Utjecaj flavanona na aktivaciju trombocita

Iako je antiagregacijsko djelovanje flavonoida zabilježeno za značajan broj flavonoida, mehanizam tog djelovanja nije poznat za većinu. Biokemijske karakteristike flavonoida, posebice lipofilnost, mogle bi objasniti njihovo antiagregacijsko djelovanje kroz stabilizaciju membrane trombocita, a time i pridonijeti mogućem razvoju novih antiagregacijskih lijekova. Aktivacija trombocita složen je proces koji se većim djelom odvija na membrani trombocita. Tijekom aktivacije dolazi do konformacijske promjene molekule integrina GP IIb-IIIa na koji se veže fibrinogen i von Willebrandov čimbenik. Metodom protočne citometrije s fluorescentno označenim protutijelima za GP IIb-IIIa (PAC-1) moguće je pratiti aktivaciju trombocita kao udio PAC-1 pozitivnih trombocita nakon stimulacije s agonistom TRAP-6. U ispitivanju se koristila krv dobrovoljnih darivatelja Hrvatskog zavoda za transfuzijsku medicinu koji su pisanim pristankom ujedno i potvrdili da nisu na antiagregacijskoj terapiji. Ispitivanje je provedeno na plazmi bogatoj trombocitima (engl. platelets rich plasma, PRP), na protočnom citometru FC 500 (Beckman Coulter, SAD). Trombociti su kao stanice izdvojeni prema citogramu veličine (engl. forward scatter, FSC) i zrnatosti stanica (engl. side scatter, SSC) koje su CD61 pozitivne na ukupno 100.000 stanica. U izdvojenoj populaciji stanica promatrao se udio stanica koje su bile GP IIb-IIIa (PAC-1) pozitivne. Rezultati za uzorke i kontrole bili uspoređeni jednosmjernim Studentovim t-testom za uparene uzorke. Smanjenje ekspresije GP IIb-IIIa (PAC-1) djelovanjem otopine flavanona, 0.5 mM, na modelu aktiviranih trombocita uz TRAP-6 u četiri neovisna uzorka u triplikatu iznosilo je 35% (p < ; 0, 001). Metoda protočne citometrije predstavlja osjetljivu tehniku za praćenje djelovanja flavonoida na aktivaciju trombocita. Utvrđeno je statistički značajno smanjenje aktivacije trombocita pri visokim koncentracijama flavanona. Povećanje osjetljivosti metode moglo bi se postići uz optimizaciju koncentracije agonista što bi vodilo praćenju djelovanja flavonoida i pri niskim koncentracijama ostvarivim kroz prehranu.

flavanon ; trombociti

nije evidentirano