hrvatski

Apoptoza u štakorskom fetalnom testisu nakon ekspozicije DNA demetilirajućem agensu

DNA demetilirajuće sredstvo 5-azacitidin (5azaC) remeti spermatogenezu u odraslih glodavaca nakon duže ekspozicije. Nakon samo jedne injekcije skotnim ženkama, 5azaC je djelovao kao teratogen, pa su otkrivene malformacije štakorskog zametka i promjene na placenti. Cilj nam je bio istražiti efekt 5azaC na razvoj fetalnog štakorskog testisa. 5azaC je apliciran jednokratno i.p. injekcijom13, 14, 15 ili 16 dana trudnoće skotnim ženkama štakora soja Fisher. Dvadesetog dana su izolirani fetalni testisi. Morfološkim i ultrastrukturnim (TEM) analizama su u svim eksperimentalnim skupinama pronađeni poneki gonociti u stadiju apoptoze. U skupini koja je tretirana 15-og dana in utero pronađene su brojne stanice u srednjoj i kasnoj fazi apoptoze. TUNEL metodom i imunohistokemijskom detekcijom na polutankim Tokuyasu smrznutim rezovima detektiran je γ -H2AX (Asp175) koji je rani biljeg apoptoze. Najviš eapoptotičnih stanica otkriveno je TUNEL metodom u testisima koji su eksponirani 15 i 16 dana trudnoće. γ -H2AX (Asp175) pozitivnih stanica bilo je manje. Radilo se o γ -H2AX (Asp175) fokalnoj ekspresiji u jezgrama stanica sa morfološkim karakteristikama ranog i srednjeg stadija apoptoze. U testisima netretiranih kontrolnih fetusa nije bilo niti apoptotičnih stanica niti biljega apoptoze. Rezultati istraživanja ukazuju na to da je 15. dan trudnoće najvjerojatnije period razvoja testisa najosjetljiviji na utjecaj DNA demetilirajućeg sredstva 5-azacitidina.

5-azacitidin; testis; fetus; štakor; γ -H2AX; apoptoza

nije evidentirano