hrvatski

Analiza endotelnih stanica šuplje vene hiperkalcijemijskih štakora protočnom citometrijom

UVOD: Endotelne stanice koje u lipide membranskih lipidnih splavi ugrađuju polinezasićene masne kiseline smanjeno unose kalcij nakon izazvanog oksidacijskog stresa. Razbijanje lipidnih splavi snižava unos kalcija u stanice. Rezultati na opisanim staničnim pokusnim modelima ukazuju na prisustvo kalcijevih transportera unutar lipidnih splavi. Glikosfingolipid CD77 je važna građevna molekula lipidne splavi. CILJ ISTRAŽIVANJA: Odrediti udio dviju subpopulacija endotelnih stanica (CD34+) stanica šuplje vene (koje sadrže odnosno ne sadrže glikosfingolipid CD77) kod štakora s nalazom hiperkalcijemije u odnosu na štakore s normalnom koncentracijom kalcija u krvi. MATERIJALI I METODE: Mužjaci štakora soja Sprague- Dawley, starosti 6 tjedana postigli su nalaz hiperkalcijemije pijenjem prirodne vode obogaćene s CaCl2 (postotna masena koncentracija 1, 5% elementarnog kalcija) tijekom 14 dana. Konačno je hiperkalcijemijska skupina sadržavala 8 štakora. Kontrolna skupina bili su Sprague-Dawley štakori starosti osam tjedana (n=9) koji su pili prirodnu vodu. Uzorci suspendiranih stanica šuplje vene imunobojani su s protu-CD77-FITC i protu-CD34-PC5 protutijelima. Fluorescencija dvostruko obojenih stanica izmjerena je protočnim citometrom Epics XL. REZULTATI: Hiperkalcijemija je značajno smanjila postotak CD34+CD77- stanica, dakle endotelnih (CD34+) stanica šuplje vene koje ne sadrže glikosfingolipid CD77 (0, 420, 20 nasuprot 3, 270, 86% kod kontrolnih štakora ; p=0, 010). Hiperkalcijemija je smanjila postotak ukupnih endotelnih stanica (1, 79 nasuprot 6, 17% kod kontrolnih štakora), ali statistički beznačajno. Postotak ukupnih CD77+ ostao je nepromijenjen. ZAKLJUČAK: Endotelne stanice šuplje vene koje sadrže glikosfingolipid CD77 u vanjskom jednosloju plazma membrane su otporne na hiperkalcijemiju. Optimiziranje koncentracije CD77 u endotelnim stanicama krvnih žila, moglo bi doprinijeti njihovom očuvanju u uvjetime hiperkalcijemije i time spriječavanju mogućeg razvoja krvožilnih bolesti.

endotelne stanice; hiperkalcijemija; CD77

nije evidentirano